产品货号：
BTN13-40000
中文名称：
志贺氏菌属PCR试剂盒
英文名称：
Shigella spp. PCR Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒是根据PCR原理开发的志贺氏菌属检测的通用试剂盒。
志贺氏菌属(Shigella Castellani)是一类革兰阴性短小杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，主要流行于发展中国家，通称痢疾杆菌，耐寒，能在普通琼脂培养基上经过24小时生长，形成直径达2mm大小、半透明的光滑型菌落。在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。大小为0.5～0.7×2～3μm，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，多数有菌毛。革兰氏阴性杆菌，是人和灵长类动物的肠道致病菌，引起细菌性痢疾。因此快速灵敏检测志贺氏菌属具有重要的意义。
试剂盒特点：
试剂盒组成：
保存：-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
使用方法：
一、样品DNA的制备
1．用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL志贺氏菌属通用PCR阳性对照的10000倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。
二、设置PCR反应（40μL体系）
3．对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
4．按下表设置PCR反应：
三、电泳检测
5．取10-20μL PCR产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
相关搜索：志贺氏菌属PCR试剂盒，志贺氏菌属通用PCR试剂盒，Shigella spp. PCR Kit
志贺氏菌属(Shigella Castellani)是一类革兰阴性短小杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，主要流行于发展中国家，通称痢疾杆菌，耐寒，能在普通琼脂培养基上经过24小时生长，形成直径达2mm大小、半透明的光滑型菌落。在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。大小为0.5～0.7×2～3μm，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，多数有菌毛。革兰氏阴性杆菌，是人和灵长类动物的肠道致病菌，引起细菌性痢疾。因此快速灵敏检测志贺氏菌属具有重要的意义。
试剂盒特点：
- 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
- 引物经过精心优化，专一性强，只扩志贺氏菌属，与其他病原没有交叉反应。
- 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
- PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
- 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1mL |
| 超纯水 | 1mL |
| 志贺氏菌属通用PCR引物混合液 | 100μL |
| 志贺氏菌属通用PCR阳性对照（1×108拷贝/μL） | 50μL |
保存：-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
使用方法：
一、样品DNA的制备
1．用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL志贺氏菌属通用PCR阳性对照的10000倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。
二、设置PCR反应（40μL体系）
3．对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2个样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 20μL | 20μL | 20μL |
| 志贺氏菌属通用PCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 18μL | - | - |
| PCR阴性对照（水） | - | 18μL | - |
| PCR阳性对照（10000倍稀释后） | - | - | 18μL |
4．按下表设置PCR反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5min |
| PCR反应 （35个循环） | 95℃ | 30sec |
| 55℃ | 30sec | |
| 55℃ | 30sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7min |
三、电泳检测
5．取10-20μL PCR产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
相关搜索：志贺氏菌属PCR试剂盒，志贺氏菌属通用PCR试剂盒，Shigella spp. PCR Kit